2020-10-29 來源：藥時代
2020年9月25日，上海邦耀生物科技有限公司（以下簡稱“邦耀生物”）宣布與浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院合作開展的“PD1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞治療復發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床試驗”取得突破性成果。這是世界上首次利用基因編輯技術(shù)在PD-1位點實現(xiàn)定點整合的CART治療，也是全球首例非病毒定點整合CART細胞治療淋巴瘤的臨床試驗。這條新聞在藥時代公眾號上進行了同步發(fā)布，引起了許多朋友的密切關(guān)注。
風頭正勁的“基因魔剪”
與炙手可熱的CART
2020年10月7日下午5時48分，備受關(guān)注的諾貝爾化學獎獲獎名單揭曉：法國微生物學家、遺傳學家和生物化學家Emmanuelle Charpentier教授和美國生物學家Jennifer Doudna教授因二位在新一代基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9方面的杰出貢獻而獲得殊榮。CRISPR/Cas9素有“基因魔剪”之稱，利用這項技術(shù)，研究人員可以按照特定的需求去改變動物、植物和微生物的DNA。這將對生命科學產(chǎn)生革命性的影響，可以幫助研究者開發(fā)新的癌癥療法，并使治愈遺傳疾病的夢想成為現(xiàn)實。CRISPR/Cas9技術(shù)提供了一種修改、調(diào)控和觀察基因組的工具，極大地加快了科學研究的腳步。這讓它可以在廣泛運用于生物研究和生物技術(shù)方面。
CART療法即嵌合抗原受體T細胞免疫療法，英文全稱Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy。這是一種治療腫瘤的新型精準靶向療法，近幾年通過優(yōu)化改良，在臨床腫瘤治療上取得很好的效果，是一種前景良好的新型腫瘤免疫治療方法。與普通的抗腫瘤藥物相比，CART治療更精準、殺瘤范圍更廣、效果更持久。
現(xiàn)在主流的CART產(chǎn)品通常需要使用慢病毒感染來進行制備，非病毒自體CART產(chǎn)品目前還較為少見。面對近期邦耀生物利用這種新技術(shù)在臨床上取得了全球首例的突破性成果，藥時代團隊走近了邦耀生物團隊，對邦耀生物聯(lián)合創(chuàng)始人/CEO席在喜先生（左1）、邦耀生物聯(lián)合創(chuàng)始人、腫瘤免疫研發(fā)副總裁杜冰博士（左2）和邦耀生物合伙人、創(chuàng)新CART項目負責人張楫欽博士（左3）進行了面對面的交流。
圖一：邦耀團隊接受藥時代專訪
此CART非彼CART
非病毒 + 定點整合大有學問
雖然目前主流的CART細胞在臨床上也取得了相當不錯的效果，但是科學探索的道路總是永無止境的。能夠找到更好的制備方法，取得更好的治療效果，規(guī)避舊有的不良反應(yīng)，是每一位科學家日夜所望的。在采訪中，杜冰博士和張楫欽博士為我們講解了邦耀生物這次的非病毒CART較傳統(tǒng)CART有什么區(qū)別和優(yōu)勢。
（以下內(nèi)容整理自杜冰博士和張楫欽博士采訪速記）
非病毒 VS 病毒
更安全，更高效
傳統(tǒng)的CART療法是利用基因工程技術(shù)，把一個含有能識別腫瘤細胞且激活T細胞的嵌合抗原受體的病毒載體轉(zhuǎn)入T細胞，即把T細胞改造成CART細胞，然后再注射入病人體內(nèi)進行治療。這種策略往往需要用到慢病毒進行感染。一方面慢病毒生產(chǎn)成本很高、工藝相對復雜，另一方面會帶來隨機插入的癌變風險。
針對這一問題，我們想到了充分利用基因編輯平臺的優(yōu)勢，在不使用病毒的前提下去生產(chǎn)CART細胞。因此，邦耀生物開發(fā)了具有自主知識產(chǎn)權(quán)的非病毒定點整合CART技術(shù)(Quikin CART?)，可以在不使用病毒載體的情況下，利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)將CAR元件定點插入到基因組的特定位點，從而開發(fā)屬于邦耀生物2.0版CART的管線產(chǎn)品。
另外，我們最大的優(yōu)勢是在對T細胞的改造上。與其他公司改造TCR不同，我們是在PD-1上進行定點整合的。原有的CART制備是先用病毒感染，然后再用基因編輯進行敲除。Quikin CART?技術(shù)無需采用病毒載體進行細胞制備，一步即可實現(xiàn)CAR元件在基因組的定點整合和T細胞內(nèi)源基因的調(diào)控干預，這既簡化了工藝流程，降低了生產(chǎn)成本，也大大縮短了制備時間。
定點整合 VS 隨機插入
更穩(wěn)定，更可控
慢病毒感染過程中CAR元件是隨機插入基因組的，這意味著每個細胞都是不同的。這種插入方式其實對每個細胞的影響是很大的，對CART細胞的狀態(tài)和功能會帶來一定的不確定性，這也導致了終產(chǎn)品的均一性會比較差。而邦耀的Quikin CART?產(chǎn)品因為是定點整合，所以均一性很高，效果也更加穩(wěn)定。
邦耀的Quikin CART?平臺可以選擇一個特定的位點插入CAR元件，這個位點可以是對T細胞功能產(chǎn)生明顯提高的位點，比如我們這次選擇了大家公認的免疫檢查點PD-1位點。在此前，抑制PD-1信號通路大都通過抗體藥物來實現(xiàn)的，而利用基因編輯改變PD-1來提升T細胞性能的報道還比較少。從目前的臨床結(jié)果來看，敲除PD-1的CART細胞在病人身上不僅取得了良好的療效，而且病人身上的細胞因子釋放綜合癥（CRS）等副作用也是比較小的。
局限血液瘤 VS 擴展至更多腫瘤
適用性更廣，造福更多病患
邦耀的非病毒定點整合CART細胞一開始就比普通的CART細胞有更大的改造空間，所以在選擇適應(yīng)癥的時候我們就選擇了挑戰(zhàn)性更大的復發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤而非急淋。因為在急淋治療中，常規(guī)的CART療法已經(jīng)能夠達到相當不錯的效果，如果我們這時候只是換了一個治病的方法，沒有太多的意義。所以我們想聚焦在普通CART細胞更難起到效果的領(lǐng)域，例如淋巴瘤和實體瘤。目前我們正在做一些實體瘤的臨床試驗，未來會逐步披露相關(guān)的臨床數(shù)據(jù)。
新技術(shù)的開發(fā)歷程
從九死一生到守得撥云見日開
從2017年11月到2020年9月，不到三年的時間，邦耀的Quikin CART?技術(shù)平臺就已搭建完成，并且在臨床上取得了突破性進展。這樣的成就可以說看上去一帆風順，然而在采訪中，杜冰博士和張楫欽博士為我們帶來了這項技術(shù)發(fā)展背后經(jīng)歷的種種困難和挫折。
困難1
CART里的無人區(qū)，每一步都在探索
CART雖然是一個大熱的研究方向，但是市面上大多數(shù)的CART產(chǎn)品都是利用慢病毒感染來制備的，用非病毒定點整合的方式制備CART細胞鮮有人進行研究。張楫欽博士在訪談中直言：“創(chuàng)新意味著挑戰(zhàn)和失敗，既然選擇了這個方向就義無反顧的前行。基因編輯在大多數(shù)細胞治療中幾乎都是使用敲除的方式進行的，做定點整合的課題組少之又少，因為定點整合難度大而且效率非常低，在T細胞中尤其如此。做的人少，意味著我們能夠參考的東西就很少，很多時候基本上都是靠我們的科學家團隊在摸索?！?
2018年Nature上發(fā)表了一篇首次利用非病毒定點整合方法編輯T細胞的論文，這篇論文的出現(xiàn)一方面給了邦耀的科學家們緊迫感，另一方面也像一顆定心丸，告訴黑暗中探索的科學家們勝利的曙光近在咫尺。
談及這篇文章，張博士說道：“與這篇文章相比，他們當時只是做到動物模型上，而我們當時的目標是奔著臨床去的。發(fā)文章更關(guān)注這個技術(shù)是不是有可能實現(xiàn)，而我們更關(guān)注的是這個技術(shù)在臨床上是否可行，是否可以推廣?！?
困難2
難見起色的陽性率，科學與商業(yè)陷入兩難
與慢病毒感染制備的CART細胞相比，非病毒定點整合CART細胞的陽性率是比較低的?；貞浧饘嶒灈]有進展的日子，張博士說道：“最開始做的時候，各個方向都需要做大量的探索。因為CAR長度較長，意味著定點整合的效率會比較低。當時這個項目開始時大家都抱有很大壓力。因為這方面做出嘗試的人很少，大家都認為成功的幾率不大。與目前常規(guī)的慢病毒制備相比，這種方法在陽性率上看上去沒有什么競爭價值，但是，我們相信在其他方面它會有自己的優(yōu)勢。
在這個時候，與多所高校合作的特殊背景就起到了很重要的作用。因為背靠高校，我們在項目上可以更自由地去選擇更加有探索性的課題。就算最后得不到我們想要的結(jié)果，走不到臨床，我們也可以將其作為一個科研項目來推進。
話雖如此，我們當時做這一項目也經(jīng)歷了許多科學家的嚴格驗證，因為邦耀本身的科學家團隊非常強大。可能公司的商業(yè)部門更多的是從商業(yè)運營、商業(yè)開發(fā)的角度去選擇項目，但是科學家團隊可能關(guān)注的更多的是這項技術(shù)本身的創(chuàng)新性和未來。當時經(jīng)過專業(yè)評估，我們整體對這個項目的價值和潛力還是很看好的，雖然我們可以預料到在研發(fā)的過程中會遇到很多的困難?！?
困難3
新冠疫情爆發(fā)，臨床進展受阻
在經(jīng)過無數(shù)次摸索、嘗試和優(yōu)化，這項技術(shù)終于可以推上臨床，進行IIT試驗（研究者發(fā)起的臨床試驗）了。然而此時，新冠疫情全面爆發(fā)，這項臨床試驗又不得不推遲。
面對臨床試驗的推遲，杜冰博士說道：“IIT對于我們來說是至關(guān)重要的。因為我們的產(chǎn)品只有通過IIT才能收到真正的臨床反饋，我們在IIT中通過醫(yī)生和病人返回的數(shù)據(jù)，我們才能對這種新產(chǎn)品進行更好的改進，來進一步提升它的安全性和有效性。目前的IIT規(guī)模有9例了，IND的申報工作也在緊鑼密鼓的進行中。因為目前對IIT的最大考量因素就是安全性評價的問題。受到疫情的影響，試驗進度被耽誤了許多，雖然我們已經(jīng)在國內(nèi)疫情得到控制后的第一時間就安排推進了臨床試驗，但是還是受到了較大的影響，目前病人的入組還在持續(xù)進行中。”
因為這項技術(shù)在臨床前實驗中就有表現(xiàn)優(yōu)秀，臨床上的好消息雖然遲了幾個月，但仍然如約而至。
守得撥云見日開
三個里程碑，以及未來無限的想象空間
在Quikin CART?研發(fā)的道路上，有三個里程碑是最讓兩位科學家感到激動和振奮的。
1、陽性率的提升：在剛做這個項目的時候，團隊在有限幾個位點的嘗試中就檢測到10%左右的陽性率。張博士表示這算是比較幸運的結(jié)果，因為理論上可以編輯的位點有很多，而不同位點的陽性率可能存在很大差異。起始還能接受的陽性率給了團隊繼續(xù)改進方法來推進這個項目的動力。隨著后面不斷的改進和嘗試，現(xiàn)在的陽性率已經(jīng)得到了大幅提升。
2、體外殺傷試驗：確定了陽性率后，就要確定制備出來的CART細胞是否能真正的發(fā)揮作用。臨床前實驗結(jié)果顯示，Quikin CART?平臺制備出來的這種非病毒定點整合CART細胞與一般慢病毒感染CART細胞相比，具有相似甚至更好的效果。
3、臨床數(shù)據(jù)：臨床結(jié)果才是檢驗一項技術(shù)是否有效的標準。張博士表示，臨床上目前給到的結(jié)果“出乎意料地好”。一方面，病人的淋巴瘤得到明顯緩解，產(chǎn)品的有效性非常明顯；另一方面，根據(jù)臨床醫(yī)生的反饋，目前的CRS反應(yīng)都比較輕微，效果很好，“CART細胞就像是默默地在絞殺腫瘤細胞”。
談到這項技術(shù)的未來發(fā)展，張博士表示：“細胞療法的未來有無限的潛力，因為可編輯的位點數(shù)不勝數(shù)，這就賦予了基因編輯科學家們無限的想象力。我們相信未來還會有更多更好的CART產(chǎn)品出現(xiàn)，造福于廣大罹患惡性腫瘤的患者！”
聽完兩位科學家講述Quikin CART?的發(fā)展歷程后，我們對邦耀這家孵化于紫竹科學園區(qū)的企業(yè)背后的故事產(chǎn)生了濃厚的興趣。藥時代團隊此次也有幸采訪到了邦耀公司的CEO席在喜先生，從他娓娓道來的講述中了解了邦耀作為一個新興的生物技術(shù)公司的發(fā)展歷程和其背后的情懷與價值理念。
邦耀的故事
從2名員工到6000 m2 GMP中試基地
科學家與企業(yè)家雙引擎
2013年，留美歸國科學家劉明耀教授、李大力教授團隊在Nature Biotechnology上發(fā)文，全球首次利用CRISPR/Cas9基因編輯了哺乳動物基因，依托基因編輯技術(shù)的研發(fā)力量和優(yōu)勢，邦耀生物應(yīng)運而生。這是一家以基因編輯技術(shù)引領(lǐng)創(chuàng)新，開發(fā)突破性療法，造福全人類為使命的高新技術(shù)企業(yè)，總部位于上海元江路新光華創(chuàng)智園。2015年4月，連續(xù)創(chuàng)業(yè)家席在喜先生作為一名建樹頗多的企業(yè)家，放下了成功過往，與邦耀科學家團隊結(jié)緣于基因編輯技術(shù)，開啟了邦耀生物的新篇章，也為邦耀生物增添了企業(yè)家的新引擎，科學家與企業(yè)家的雙引擎模式快速的推動著企業(yè)的發(fā)展。
采訪中席先生表示，邦耀生物致力于成為新商業(yè)文明時代全球領(lǐng)先的基因細胞藥企，依托自主研發(fā)中心及與華東師范大學共建的“上?；蚓庉嬇c細胞治療研究中心”，過去5年已產(chǎn)生110項專利成果，有5個項目在8所知名醫(yī)院開展IIT試驗，其中3個項目進入IND申報階段，并在Nature Biotechnology, Nature Medicine 等國際知名期刊上發(fā)表了12篇高水平的學術(shù)論文。邦耀生物已搭建基因編輯、細胞治療與基因治療三大技術(shù)平臺，并擁有6000平米GMP中試基地及近100人的運營團隊，有力保障創(chuàng)新的研究成果能夠快速轉(zhuǎn)化與應(yīng)用。邦耀生物通過患者需求和臨床反饋不斷推動研發(fā)產(chǎn)品快速更新迭代。并秉持開放、共享、共贏的態(tài)度，與全球創(chuàng)新生物醫(yī)藥生態(tài)鏈企業(yè)一起，加快推進創(chuàng)新藥物的轉(zhuǎn)化與落地，造福全球遺傳疾病及惡性腫瘤患者！
情懷，不只情懷
誠然，過去的成功并非偶然。移動互聯(lián)網(wǎng)、大數(shù)據(jù)、云計算等科技的不斷發(fā)展把人類帶入新商業(yè)文明時代，顛覆性創(chuàng)新成為創(chuàng)業(yè)者的靈魂，席在喜就是這個時代崇尚跨界與顛覆性創(chuàng)新的連續(xù)創(chuàng)業(yè)者，骨子里的不羈和“不安分”推動著他不斷奔跑著追逐夢想，在外人看來兩次創(chuàng)業(yè)實現(xiàn)財富自由的席在喜可以安靜下來享受生活，或許，曾經(jīng)徒步穿越過羅布泊、與王石同期登過玉珠峰的他感興趣的是下一座還沒攀登的高峰。直到那天，他的一位摯友、年僅36歲的創(chuàng)業(yè)伙伴因罹患癌癥去世，這個噩耗讓他開始重新思考他的人生目標。經(jīng)過幾個月的思考，他決心放下手上一切，將所有精力投入到下一個人生的目標高峰：聯(lián)合創(chuàng)建一家生物技術(shù)公司來攻克癌癥和威脅人類生命的疾病。
2015年4月，時值第三屆中國（上海）國際技術(shù)進出口交易會知識產(chǎn)權(quán)交流大會，席在喜第一次近距離地了解到了生命科學領(lǐng)域這個對他來說全新甚至陌生的領(lǐng)域?；趯蚓庉嫾夹g(shù)的好奇心驅(qū)使，席在喜拜訪了時任華東師范大學生命科學學院的劉明耀院長，表達了自己希望在生命科學領(lǐng)域做一些對人類有意義的事情。一個跨界企業(yè)家義無反顧的決心打動了科學家團隊，邦耀生物從此開啟了新的發(fā)展時代。
“那時除了劉明耀教授和幾個兼職科學家，整個公司的全職人員只有兩位，辦公室是紫竹免費提供的一間小房子。而現(xiàn)在，我們已經(jīng)有了全新的辦公地點，還有一個6000平米的GMP中試基地?！毕壬c我們坐在即將搬離的舊辦公室里，聊起這五年來企業(yè)的發(fā)展，一時間不禁感慨萬千。
圖為邦耀新落成的辦公室
“中國在化藥時代與國際藥廠的差距巨大，在靶向藥物、抗體藥物上與國際藥廠大大的縮小了差距，在基因細胞藥物時代，中國的起步與發(fā)展速度都已基本與世界水平接軌了?！痹谡劶爸袊镝t(yī)藥的過去、現(xiàn)在和未來時，席在喜表示我們正處于最好的時代，生物科技飛速發(fā)展，200多年間的幾次工業(yè)革命把人類帶到新的高度，人類在向外探索的各個領(lǐng)域都取得了革命性的發(fā)展，而人類在生命科學領(lǐng)域的探索更迫切需要革命性的突破，基因編輯、細胞治療等新技術(shù)為我們帶來了新的機遇，中國的IIT政策為中國生物藥企帶來了新的競爭力，能夠更有力地推動像邦耀生物這種以基因編輯技術(shù)引領(lǐng)創(chuàng)新的新興的生物科技公司快速發(fā)展。
使命——商業(yè)之外的價值
毋庸置疑，CART產(chǎn)品的售價是昂貴的，諾華的Kymriah定價為47.5萬美元，Kite的Yescarta定價為37.3萬美元。雖然此次邦耀生物的Quickin CART?在制備上規(guī)避了病毒的使用，從原料和工藝成本上節(jié)省了許多費用，但是作為精準醫(yī)療和個性化定制治療方案的一種新技術(shù)，相比于成熟的流程化的傳統(tǒng)治療手段，CART治療的費用因為前期大量的科研投入和對技術(shù)的高要求在現(xiàn)階段仍然居高不下。
就像上個世紀計算機剛面世時，埃尼阿克的體積何其龐大，價格何其昂貴。而幾十年后的今天，計算機的普及程度已經(jīng)遠遠超過當時人們的想象了。技術(shù)的革新和發(fā)展會讓真正有價值的東西一直延續(xù)、進化和發(fā)展。相信CART技術(shù)作為一種新興的治療方式，因其獨特的療效和優(yōu)勢，也會隨著技術(shù)的更新迭代和國家的政策扶植來造福更多患者。
正如邦耀生物的企業(yè)使命所言：以基因編輯技術(shù)引領(lǐng)創(chuàng)新，開發(fā)突破性療法，造福全人類！在未來，相信邦耀生物會致力于技術(shù)革新，在企業(yè)家和科學家雙引擎的驅(qū)動下，率先發(fā)現(xiàn)癌癥等危及人類生命疾病的解決方案，成為全球領(lǐng)先的細胞基因藥企！
文章轉(zhuǎn)載自 藥時代，原文鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/ekWsCnzUoXhOiwhVYVYZYQ
